Openfield 的行為觀察
一. 通常觀察嚙齒類動物在0F中的如下行為:
1-探究行為(explore) 包括用鼻子嗅聞空氣和曠場地板氣味等運動行為。該運動通常
表現為彎曲的運動路線,運動速度很慢.而且動物身體腹部常緊貼著曠場地板。
2-走動行為(walk) 常表現為較直的運動路線和相對較快的活動速度,且不用鼻子嗅
聞空氣和曠場地板氣味等運動行為。
3.旋轉行為(spinturn) 包括追逐自己尾巴而形成的固定模式的環繞運動。
4·自我梳理行為(selfgroom) 快速清潔面部、前足和身體的行為。典型的完全的梳理
過程通常開始于動物輕輕地搔抓面部。動作逐漸增多并沿著身體向下.終止于尾尖。不論完
全梳理和非完全梳理過程(常在梳理身體時中斷)均應被計人“梳理”過程。
5·坐(sit) 睜著眼睛而嗅聞空氣的非運動狀態。定義“坐”的*小非運動時間應為3s。
6.睡眠(sleep) 眼睛緊閉且完全不運動狀態。
7·伸展注意行為(stretchattend) 動物伸展身體,特別是從比較**之處(如曠場角落)
向著相對較不**之處(曠場中央部分)伸展身體.是動物對危險的評價行為。動物腹部保持
平坦緊貼曠場底部,并用鼻子嗅聞空氣和地板氣味。當頭部和前足向前伸展時,后足保持不
動一該行為往往結束于前足“后退一步”,從而使身體不再伸展。當進行一系列伸展注意行為
時或者伸展注意行為之后進行運動活動則“后退一步”行為就不完整:在此情況下,應對任何
一次身體完全伸展記數為。伸展注意”行為.
8·返回行為(return) 當進行非常慢的探索行為時,動物經常返回到起點。在整個過程
中動物腹部緊貼曠場底部保持平坦.
9·后腿站立(rear)動物站立.雙前足離開地板:沿曠場側壁站立時.動物常靠在曠場
側壁上。
10.gt6(jump)所有四足全部離開曠場地板。
通常研究的指標還包括累積運動(locomotion)包括探究和走動。對于運動、走動、探索.旋轉、坐、梳理和睡眠等行為.既要記錄行為的發生頻率(frequency),也要記錄行為的持續時間(duration),通常記錄5min測試時間內的發生頻率和總持續時間;對于伸展注意、返回行為、后腿站立和跳動則僅記錄5rain內的發生率一同時,還應記錄從動物放入OF的一刻起.到所發生任何一個行為的潛伏期.OF通常分為5個部分(圖30一1),按照發生每個行為時所處的位置對每個行為進行打分:
①四角之一(總面積的8.16%):
②四壁之一(40.82%);
③外環(32.65%):
④內環(16.33%);
⑤中央(2.04%)。
當動物四足全部進入圖中某個領域時方可認為動物已經進入該領域。由于伸展注意行為是一個“定向性”的行為,所以不以動作發生時的位置評分,而以動作所指的區域(如伸展注意外環就是指伸展姿勢由曠場側壁指向外環)。另外,動物在曠場角落和沿側壁的時間總和記作趨觸性總分。
動物從放入OF的一刻起的各種潛伏期也可用于評估,如離開角落潛伏期、離開側壁潛伏期、進入內環潛伏期、進入中央潛伏期、后腿站立潛伏期、位于中央時后腿站立潛伏期、沿側壁后腿站立潛伏期、非趨觸性位置后腿站立潛伏期、自我梳理潛伏期、返回行為潛伏期、走動潛伏期、伸展注意潛伏期或伸展注意不同曠場部位的潛伏期等。
動物接受不同劑量電離輻射作用后,通過檢測動物在曠場中各種行為指標的變化反映電離輻射對動物行為的作用規律。
二、器材
動物行為測量和分析自動化系統.包括】.0m×1.0m大小的曠場箱、變焦攝像頭、圖像采集卡、計算機、行為測量和分析自動化軟件;5%醋酸,
三、方法和步驟
實驗時,曠場上方的攝像機采集動物在曠場中的行為表現,通過圖像采集卡傳人計算機記錄、存儲并分析。具體過程如下:
(--)輻射動物
成年雄性SD大鼠60只,隨機分為4組,分別受到0、8、20、25Gy的1射線照射,以制備假輻射(OGy)、中度骨髓型放射病(8Gy)、腸型放射病(20Gy)和腦型放射病(25Gv)等動物模型。分別于照后即刻、24h、48h對各組動物進行分組測量,每個時問點測量每組動物5只,每只動物僅測量一次。不重復檢測。
(二)曠場測量
1.調整曠場位置,使之位于攝像頭正下方;
2.調整實驗室內光線,使之形成漫反射光.而且曠場內部沒有較大的反光斑:
3.用5%的醋酸一水溶液清洗曠場,使之不殘留其余異味.以后每只動物檢測之后均需用5%的醋酸一水溶液清洗曠場,以免動物之間通過氣味傳遞信息;
4.將動物分別從同一起步點放入曠場箱,進入曠場箱后隨其自由活動,同時開啟行為記錄和分析自動化系統程序,通過計算機記錄動物活動情況;
5.每只動物測量5min,測試每只大鼠后.對每只動物的排便情況進行記錄和清理,并用5%醋酸徹底清潔實驗箱;